人套細胞淋巴癌細胞

人套細胞淋巴癌細胞

一、客戶收到細胞后需注意事項：

1、收到細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。

2、收到細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。由于運輸途中的影響，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。

3、收到細胞后，請顯微鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的*培養液，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以提高5％去培養。若細胞達到80%左右，血清濃度按照說明書要求進行調配。

4、收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下 5-10ML培養基繼續培養；超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基培養，懸浮細胞后移回培養瓶。

5、將培養瓶置于37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。

6、24小時后，細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘?？梢苑湃?7℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2 培養。    

    二、培養注意事項：

　　1、實驗進行前，無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后，再進行下一個細胞系的操作。

　　2、無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70% ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在抬面之中央無菌區域，勿在邊緣之非無菌區域操作。

　　3、工作人員應注意自身之安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

三、癌細胞究竟是如何"活動"的

一說起癌癥，我們首先聯想到的就是絕癥、死亡之類的詞匯。

因為癌癥給人們的生命健康造成了巨大的威脅，也給*的科學家們出了一道難題，人類*攻克癌癥、治愈癌癥的道路還很漫長。

同時我們也知道，癌癥也叫惡性腫瘤，癌細胞不是正常的細胞，它會一直瘋長，掠奪人體有限的能量供應，后把人體系統搞崩潰死亡。

可能有人不禁要問，癌細胞為什么一直要瘋長得停不下來，為什么要“殺死人”，人死了它不也就死了嗎？

要想解答這個疑惑，我們就要從癌的來龍去脈開始，進行一番了解。

人只要活著，體內的細胞就會不停分裂，新細胞誕生，老細胞si去，維持著相對的平衡狀態。但是，細胞在分裂的過程中，會因外界、本身的原因發生“基因突變”，導致細胞不受控制的分裂，形成癌癥。

大量消耗身體營養：癌癥在瘋長的過程中，需要大量的營養供給，因此許多惡性程度較高的癌癥病人往往后期會出現“惡病質”體征。

癌癥就好比貪得無厭的“寄生蟲”，把身體里的“養分”全都吸收光了，機體就會出現各個臟器功能衰竭，許多癌癥患者，后都是這個原因死掉的。因此對于短時間內無緣由消瘦很多的人來說，需要盡早去進行檢查。

血管破裂：癌細胞不停地分裂，體積不停地增加，當生長到一定程度時，必然會壓迫到器官血管，甚至造成血管破裂，因此血管破裂也是導致死亡的主要原因之一。

各種并發癥：一些癌癥的轉移性很強，比如轉移到大腦就會導致大腦功能障礙。另外，癌癥還會形成癌栓，一旦脫落就會形成肺栓塞。

治療的副作用：癌癥治療許多都有副作用 ，比如放療導致的局部潰爛，化療導致的骨髓抑制等。

癌細胞能量代謝需要的營養物質主要有：葡萄糖、谷氨酰胺、乳酸、丙酮酸、酮體以及脂肪酸等。其中以葡萄糖為主要的能量來源。

健康細胞一般偏好在充足氧氣的供應下將葡萄糖轉化為能量物質，而癌細胞的代謝特點則是無需大量氧氣的參與。和健康細胞不同，腫瘤細胞的代謝特點是，能量利用率低，但是能夠更快速產生能量。

癌細胞的本質決定了癌細胞有*的攫取人體的養分的特性。主要的一些特性有：

生長信號紊亂：在健康組織中，細胞的分裂、靜止和“死亡”都是有著嚴密的調控機制的。而在癌細胞中，細胞的分裂信號持續產生、靜止與“死亡”的信號被“關掉”，這就導致癌細胞會出現不斷瘋長的特性。

促血管生成：血管是提供營養物質的必須途徑，為了保證自身的營養充足，癌細胞還會促進血管的生成，因此很多腫瘤組織內血供都很豐富。

逃逸免疫系統攻擊：癌細胞還特別的狡猾，在和免疫細胞不斷的斗爭中會進化自己的偽裝能力，欺騙免疫系統將自己認作是正常細胞。

所以癌細胞瘋長，是由它自身的特性所決定的。

年齡是癌癥發病的重要因素，無論什么性別，超過50歲之后，許多癌癥發病率會普遍上升。除了年齡之外，還有一些人更容易得癌，比如：

吸煙喝酒：每吸一口煙都會帶來78種明確的致癌物質，這些物質會增加肺部細胞癌變的概率。大量喝酒和消化系統癌癥（食道癌、肝癌、結腸直腸癌）有著密切的關聯。

缺少運動：越來越多的證據表明，運動過少和許多疾病存在關聯，也包括癌癥。

不良生活習慣：比如過胖、不健康的飲食習慣（吃霉變食物等）、惡劣的居住環境以及室內污染等。

不體檢：其實一些癌癥在早期發現是*可以治愈的，對于高危人群來說，進行相應的體檢很有必要。

攻克癌癥，人們還有很長的路要走。作為普通人更重，要的是“正確認識癌癥”。不要被偽科學所迷惑。人套細胞淋巴癌細胞