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13710660294
品牌 | 自營品牌 | 供貨周期 | 一周 |
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應用領域 | 醫療衛生,環保,化工,生物產業,農業 |
人肝癌細胞購買細胞注意事項:
1. 收到細胞后*先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養過夜,隔天再取出觀察。NCI-H226人肺鱗癌細胞此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯系,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
4. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于技術部溝通交流。" P4
包裝規格: 復蘇T25培養瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)
細胞規格: 1*10(5)/ml——1*10(6)/ml
安全水平: 1
細胞種屬: 人
組織來源: 肺
細胞形態: 上皮細胞樣
細胞特性: 貼壁
細胞融合度: 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細胞檢測: 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
"細胞培養三不要:
養科研細胞是生物醫學研究的基本功。有三個小經驗可以和大家分享一下:
1. 不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養基怎么越用越發紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養基中的碳酸就會轉化成二氧化碳,釋放出來。培養基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發現培養液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內的溫度高)
其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發現根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內從來就不燒瓶口。來美國以后發現這里更*,超凈臺內根本就不點酒精燈。
2. 不要頻繁看細胞。對于初學者而言,養細胞就像養孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養不好,就越是經常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環境。你跑去看細胞,培養瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長。
3. 不要怕消化。NCI-H226人肺鱗癌細胞在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我師兄在做血管平滑肌原代的時候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞*變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大,對細胞的傷害也是很大的。" 詳見細胞說明書
傳代方法: 建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件: 詳見細胞說明書
主要文獻: 請具體查閱相關發表文章
有關實驗室細胞培養基知識普及:
經典的培養基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應用*廣泛的培養基。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細胞的培養。
MEM是由Eagle’s基礎培養基(BME)發展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度。
BEM(DMEM)培養基是為小鼠成纖維細胞設計的,現在常用于貼壁細胞的培養。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。*初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。
aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應用于各種細胞類型,包括對營養成分要求苛刻的細胞。
Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的,現在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物,這種培養基已應用于許多原代培養及更難養的細胞系的培養。
RPMI 1640培養基是專為淋巴細胞培養而設計的,現在已廣泛應用于懸浮細胞的培養。
干粉培養基:以前大部分實驗室都是用干粉培養基,但配制過程就較為繁瑣,要溶解、調pH值,過濾,過程中可能會產生一些濃度誤差,而且有些實驗室的水質并不理想,所以培養的**會有差異。如果使用液體培養基,這種人為的誤差會減少,因為畢竟是大批量工業化生產的,批間差會很小。大家是不是感覺液體培養基會貴很多,以前是這樣,但現在大家都認同了。
無血清培養基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顧名思義,就是在細胞培養中不需要添加血清,但是在某些應用中可能要添加生長因子或細胞因子。NCI-H226人肺鱗癌細胞無血清培養基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生長因子、必需的營養物質和激素等,能減少上述血清帶來的不利因素,使細胞培養的條件更穩定。但它也不是**的,從有血清培養過渡到無血清培養的條件并不像想象中那么直截了當。處于發育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方,對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時,也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用,因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外,它的價格也比普通的培養基貴很多。?C7132 OACP4C細胞株 ,公司提供背景資料、生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態、培養條件、應用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息,我們擁有豐富的細胞系培養經驗,能提供細胞培養全fang位的技術支持,讓您實驗再無煩擾!人肝癌細胞
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